BC-CL01 |
BC Trans-DNA plus |
| 規(guī)格 | 1mL/1.5mL |
| 產(chǎn)品編號 | 銷售價 | 促銷價 | 庫存 | 數(shù)量 | 單位 | 加入購物車 |
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【貨號】 BC-CL01
【規(guī)格】 1ml/1.5ml
【保存】 ?2-8℃，12個月
【類型】 ?陽離子聚合物
【產(chǎn)品介紹】
BC Trans-DNA plus是一款專為難以轉(zhuǎn)染的細胞設(shè)計的DNA轉(zhuǎn)染試劑，它能夠高效地傳送質(zhì)粒DNA。相較于其他轉(zhuǎn)染試劑，BC Trans-DNA plus擁有卓越的DNA轉(zhuǎn)染能力，其優(yōu)勢在于高轉(zhuǎn)染效率、血清干擾小、低毒性、良好穩(wěn)定性、操作簡便以及出色的可重復(fù)性。
【應(yīng)用范圍】
BC Trans-DNA plus轉(zhuǎn)染試劑表現(xiàn)出廣泛的適用性，能夠高效應(yīng)對多種難轉(zhuǎn)染細胞株的DNA轉(zhuǎn)染需求，無論是瞬時轉(zhuǎn)染還是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。特別值得一提的是，該試劑在多種貼壁細胞系中表現(xiàn)出色，尤其對于BMDC、4T1、CT26、DC2.4等難以轉(zhuǎn)染的細胞類型，依然能夠?qū)崿F(xiàn)高轉(zhuǎn)染效率，并且具備良好的重復(fù)性。
【質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染步驟】
請確保所有操作都在無菌條件下進行，并遵循實驗室的安全規(guī)范。
以24孔板為例，請參考表1的轉(zhuǎn)染規(guī)模調(diào)整，步驟如下:
1. 細胞接種：在細胞培養(yǎng)板中，每孔接種0.5~1.0×105個細胞。將細胞在適宜條件下培養(yǎng)12~24小時，以確保在轉(zhuǎn)染時細胞密度達到約60~70%的融合度。
2. DNA稀釋：將所需的質(zhì)粒DNA用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋，使其終濃度達到0.1mg/mL。
3. 復(fù)合物制備：
（1）取1μL的BC Trans-DNA plus試劑原液，加入9μL的Opti-MEM培養(yǎng)基中。
（2）同時，取4μL濃度為0.1mg/mL的質(zhì)粒DNA，加入6μL的Opti-MEM培養(yǎng)基中。
（3）將上述兩者等體積混合，以形成轉(zhuǎn)染復(fù)合物。
（4）室溫靜置：讓轉(zhuǎn)染復(fù)合物在室溫下靜置10分鐘，以確保其充分結(jié)合。
4. 轉(zhuǎn)染細胞：將20μL的轉(zhuǎn)染復(fù)合物均勻加入到細胞培養(yǎng)板的每個孔中，并輕輕混勻。
5. 培養(yǎng)與檢測：將細胞在37℃下繼續(xù)培養(yǎng)18~48小時。在此期間，無需更換培養(yǎng)基。
【質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染優(yōu)化】
可通過改變細胞密度、 DNA濃度以及BC Trans-DNA plus濃度對轉(zhuǎn)染進行優(yōu)化。保證細胞融合度在60%以上，BC Trans-DNA plus (μL):DNA (μg)可以在2:1和5:1之間調(diào)整。
表1. ?不同培養(yǎng)板所需轉(zhuǎn)染試劑和DNA的用量
培養(yǎng)板
接種
培養(yǎng)基
Opti-MEM稀
釋后終體積
DNA轉(zhuǎn)染
試劑用量
DNA
96孔板
0.3cm2
200μL
10μL
0.5μL
0.2μg
24孔板
2.0cm2
500μL
20μL
1μL
0.4μg
12孔板
4.0cm2
1mL
40μL
2.5μL
1μg
6孔板
10.0cm2
2mL
100μL
5μL
2μg
60mm
20.0cm2
5mL
0.2mL
10μL
4.0μg
10cm
60.0cm2
15mL
0.6mL
30μL
12μg
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