【貨號】 BL-O010

【規(guī)格】 500mL

【保存】 10~30℃，12個月。

【產(chǎn)品簡介】

在組織切片過程中，一些含鈣組織不能直接制作切片，因為鈣和石蠟的密度不同，較難切出完整的切片。為達(dá)到骨組織既充分脫鈣，又保護(hù)組織的抗原不受破壞，需要對含鈣組織固定之后再進(jìn)行脫鈣或采用固定兼有脫鈣的液體處理，然后再進(jìn)行常規(guī)制片。用于脫鈣的試劑很多，脫鈣劑包括有機酸、無機酸、乙二胺四乙酸(EDTA)等。EDTA是一種相對較好的螯合脫鈣劑，對組織結(jié)構(gòu)影響最小，可以較好的保存組織的某些酶類，經(jīng)EDTA脫鈣后的組織可以進(jìn)行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢，一般脫需要數(shù)周至數(shù)月。

EDTA 脫鈣液主要由EDTA、磷酸鹽等組成，pH值為7.2。EDTA脫鈣液的特點是組織染色結(jié)果好，對組織的結(jié)構(gòu)損害小。但是EDTA脫鈣速度很慢，且脫鈣后組織會稍微變硬。

【使用方法】

1、骨組織脫鈣時，取材不易過厚，一般大約5mm。

2、組織固定后，用PBS清洗3次，每次20min。

3、組織用蒸餾水洗清洗3次，每次20min。

4、組織轉(zhuǎn)移至20~30倍體積的EDTA 脫鈣液中，脫鈣10~30天或更長時間。如果想加快脫鈣速度，可以置于37℃進(jìn)行脫鈣。如果必要，更換新的EDTA 脫鈣液繼續(xù)脫鈣，多數(shù)組織脫鈣2周～3個月即可，每周更換一次直至終點。

5、用蒸餾水沖洗數(shù)次。

6、常規(guī)脫水、包埋。

 

【注意事項】

1、厚度 5mm 的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣 10~30 天即可。

2、適當(dāng)加溫能加快脫鈣的速度，一般不應(yīng)超過 37~40℃，溫度過高容易使骨組織造成松散解體，尤其不可大于 60℃。

3、脫鈣應(yīng)徹底，防止脫鈣不足或過度。不影響組織切片的同時盡量縮短脫鈣時間，每隔一段時間檢測一次脫鈣程度，避免脫鈣過度，脫鈣過度會增加組織的損傷程度，影響染色結(jié)果。以免脫鈣過長引起組織損害。

4、脫鈣用具避免使用金屬容器，盡量使用玻璃容器。

5、骨組織脫鈣應(yīng)先固定后脫鈣或固定、脫鈣同時進(jìn)行，不應(yīng)先脫鈣后固定，以便減少組織的損傷程度。

6、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。