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1、為什么要進(jìn)行STR鑒定????
STR(Short tandem repeats,短串聯(lián)重復(fù)序列)基因位點(diǎn)由長(zhǎng)度為3~7個(gè)堿基對(duì)的短串聯(lián)重復(fù)序列組成,這些重復(fù)序列廣泛存在于基因組中,可作為高度多態(tài)性標(biāo)記,被稱為細(xì)胞的DNA指紋,其可通過(guò)PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))來(lái)檢測(cè)。
STR基因分型應(yīng)用于細(xì)胞鑒定已被ATCC等機(jī)構(gòu)強(qiáng)烈推薦。美國(guó)的ATCC細(xì)胞庫(kù)、德國(guó)的DSMZ細(xì)胞庫(kù)以及日本的JCRB細(xì)胞庫(kù)等為STR分型提供了各細(xì)胞株的數(shù)據(jù)供比對(duì)。越來(lái)越多的雜志在投稿時(shí)要求提供細(xì)胞STR分析數(shù)據(jù),STR已被ATCC等機(jī)構(gòu)作為細(xì)胞鑒定的金標(biāo)準(zhǔn)。
細(xì)胞作為重要的實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,廣泛應(yīng)用于各類實(shí)驗(yàn),幾乎所有科研實(shí)驗(yàn)室都需要進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。而我們也知道,細(xì)胞正確與否非常重要。如果細(xì)胞錯(cuò)誤或者存在交叉污染情況,會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)得出錯(cuò)誤的結(jié)論,所有的實(shí)驗(yàn)結(jié)果都會(huì)變得毫無(wú)意義。
據(jù)統(tǒng)計(jì),目前有超過(guò)30%的細(xì)胞系被錯(cuò)誤辨識(shí)或受到交叉污染。2010年《國(guó)際癌癥雜志》(IJC)統(tǒng)計(jì)出一列表,在346篇文章中,有103篇存在細(xì)胞被Hela細(xì)胞污染的情況。
最可怕的錯(cuò)用是在瑞典某大學(xué)的一個(gè)研究組里,該研究組從1988年起就錯(cuò)誤的使用了Hela,以為是lnt-407細(xì)胞系,并因此在從1988到2011年里發(fā)表了41篇論文,全部是錯(cuò)的在高質(zhì)量的雜志上。
近年來(lái),大量研究表明 STR 基因分型方法是進(jìn)行細(xì)胞交叉污染和性質(zhì)鑒定的最有效和準(zhǔn)確的方法之一。
2、什么情況下要細(xì)胞鑒定
1. 發(fā)表文章或申請(qǐng)課題經(jīng)費(fèi)前;
2. 使用細(xì)胞進(jìn)行臨床治療(試驗(yàn))前;
3. 準(zhǔn)備凍存保種或已凍存多年的細(xì)胞;
4. 一個(gè)涉及到細(xì)胞試驗(yàn)項(xiàng)目開(kāi)始/結(jié)束時(shí);
5. 新得到的細(xì)胞或?qū)嶒?yàn)室培養(yǎng)5代以上的;
6. 細(xì)胞系表現(xiàn)不穩(wěn)定或結(jié)果與預(yù)期差別較大;
7. 異體細(xì)胞移植后嵌合情況檢查。
非人源的細(xì)胞系,可以進(jìn)行種屬鑒定,種屬鑒定結(jié)果判定一般包含兩項(xiàng):是否為單一種屬來(lái)源細(xì)胞以及來(lái)源細(xì)胞種屬;
除了必要的種屬鑒定外,在使用細(xì)胞之前也可針對(duì)自身需求對(duì)細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)細(xì)胞特性的鑒定,如免疫熒光或流式檢測(cè)等。
用Axygen的基因組抽提試劑盒提取DNA,采用多重PCR體系,豬、牛、狗、兔、猴和貓熒光探針Qpcr擴(kuò)增方案擴(kuò)增,在ABI7500實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)儀進(jìn)行檢測(cè)。鑒定細(xì)胞樣品種屬及是否存6個(gè)種屬間的交叉污染現(xiàn)象。
3、高STR 匹配細(xì)胞
4、森貝伽細(xì)胞庫(kù)
生命科學(xué),航無(wú)止境。南京生航生物技術(shù)有限公司坐落于南京江寧高新區(qū)智慧園,于2018年正式由南京森貝伽生物成立,集中研發(fā)生產(chǎn)胎牛血清,細(xì)胞培養(yǎng)等領(lǐng)域。為了給廣大生物醫(yī)藥企業(yè),醫(yī)院,高校等科研機(jī)構(gòu)工作者提供更優(yōu)質(zhì)的服務(wù),于2023年4月正式上線細(xì)胞平臺(tái)。目前平臺(tái)擁有一支以趙教授為核心的經(jīng)驗(yàn)豐富、富有創(chuàng)新的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。平臺(tái)擁有整體萬(wàn)級(jí)(C)局部百級(jí)(A)的GMP生產(chǎn)車間及完善的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,現(xiàn)建立一套嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)范和質(zhì)量控制體系(已通過(guò)ISO9001認(rèn)證)。引種自國(guó)內(nèi)各大權(quán)威細(xì)胞庫(kù),實(shí)行凍存及三級(jí)細(xì)胞庫(kù)管理模式。嚴(yán)格的代次管控,代次低,狀態(tài)好并有高匹配的STR鑒定。選擇生航細(xì)胞系享受國(guó)產(chǎn)價(jià)格,進(jìn)口品質(zhì),并全程免費(fèi)提供技術(shù)服務(wù),客戶第一,服務(wù)至上。