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原代細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)這樣的情況，是有些細(xì)胞處于終末分化狀態(tài)，不會(huì)再分裂，時(shí)間長(zhǎng)了就會(huì)空泡化而死亡。

傳代細(xì)胞出現(xiàn)這種狀況比較少見(jiàn)，出現(xiàn)的原因一般都是因?yàn)榧?xì)胞傳代次數(shù)過(guò)多，老化嚴(yán)重。

2）PH值

培養(yǎng)液的PH值與細(xì)胞正常所需PH值差別太大。

3）胰酶消化

胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)受損，有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)這種情況。除此之外，如果消化細(xì)胞吹打時(shí)力度過(guò)大，產(chǎn)生太多氣泡，長(zhǎng)期存在也會(huì)出現(xiàn)這種現(xiàn)象。

4）自噬

5）細(xì)胞代謝

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，由于血清濃度不夠、藥物作用、外界刺激等情況下導(dǎo)致細(xì)胞代謝出現(xiàn)問(wèn)題，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀況下會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞空泡化的情況。

6）污染

衣原體感染：一旦一些細(xì)胞出現(xiàn)空泡化，繼續(xù)培養(yǎng)，空泡范圍會(huì)擴(kuò)大，即使傳代后也如此，出現(xiàn)這種情況，細(xì)胞基本無(wú)法挽救。后來(lái)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，此種細(xì)胞存在衣原體的感染。

支原體污染：支原體污染在不嚴(yán)重的時(shí)候細(xì)胞是沒(méi)有什么明顯癥狀的，而且也無(wú)法通過(guò)光學(xué)顯微鏡觀察到，只有在嚴(yán)重的時(shí)候會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)變差，出現(xiàn)細(xì)胞空泡化的現(xiàn)象，細(xì)胞膜上也會(huì)出現(xiàn)小黑點(diǎn)附著。

7）藥物誘導(dǎo)

一些特定的誘導(dǎo)劑處理，是細(xì)胞質(zhì)空泡化的原因，一般是需要觀察細(xì)胞變化而對(duì)細(xì)胞進(jìn)行的特殊處理。

2）如果是培養(yǎng)液PH的問(wèn)題，可以通過(guò)更換培養(yǎng)液調(diào)整到合適的PH值，再進(jìn)行培養(yǎng)。

3）在傳代時(shí)，要選用合適濃度的胰酶和選取適當(dāng)?shù)南瘯r(shí)間進(jìn)行消化，在操作時(shí)避免吹打太過(guò)用力出現(xiàn)太多氣泡。

4）要保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)充足，可以通過(guò)增加血清濃度和在培養(yǎng)基中加入谷氨酰氨解決。

5）盡量使用質(zhì)量好和渠道正規(guī)的胎牛血清，因?yàn)檫@樣的血清營(yíng)養(yǎng)豐富且外源刺激因子少，可以有效的避免出現(xiàn)這類問(wèn)題。

6）在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)要嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，操作時(shí)要規(guī)范，避免污染。可以通過(guò)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞是否污染，對(duì)于已經(jīng)污染的細(xì)胞滅菌后直接處理，避免污染其他細(xì)胞。