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    黑膠蟲”是近十幾年才發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞污染物，“黑膠蟲”的分類目前尚無鑒定確認(rèn)。

“黑膠蟲”可寄生于動物細(xì)胞，也可以生存于培養(yǎng)基中，依靠細(xì)胞和培養(yǎng)基中的營養(yǎng)為生，并隨細(xì)胞傳代而傳代。“黑膠蟲”與細(xì)胞競爭性生長，開始時(shí)對細(xì)胞并沒有什么影響，但當(dāng)黑膠蟲的數(shù)量多到一定程度的時(shí)候， 細(xì)胞生長就會受到影響直至死亡，嚴(yán)重影響了科研活動的開展和進(jìn)行。所以“黑膠蟲”的污染常在培養(yǎng)條件改變、細(xì)胞接種密度降低、細(xì)胞狀態(tài)不佳時(shí)顯現(xiàn)并使實(shí)驗(yàn)中斷，尤其在凍存細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可造成大量細(xì)胞死亡。

目前比較公認(rèn)的觀點(diǎn)認(rèn)為“黑膠蟲”是一種微生物，增殖緩慢但對細(xì)胞有損害，數(shù)量達(dá)到一定程度可引起細(xì)胞死亡，其來源可能是細(xì)胞本身的污染或從動物取材時(shí)污染造成的。該污染在全世界細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室中普遍存在，解決該問題是一個(gè)世界性難題。

關(guān)于是什么問題的討論

A. 玻璃培養(yǎng)瓶中的類似氧化硅的東西（曾經(jīng)有文獻(xiàn)報(bào)道過）

B. 據(jù)說這是黑膠蟲，又有人說是原生動物，好像也沒個(gè)統(tǒng)一的說法

C. 據(jù)病毒所和軍科院鑒定是一種寄生于牛血清內(nèi)的一種原蟲，似乎和草履蟲和變形蟲有類似之處，然而由于課題經(jīng)費(fèi)不夠而不能繼續(xù)進(jìn)行下去。

D. 有人說是納米級的細(xì)菌

其他的特點(diǎn)

（1）形態(tài)上有些像細(xì)菌，直徑約在0.5~1微米，

（2） 在400X倒置顯微鏡小，有典型的布朗運(yùn)動（不規(guī)則的原地小距離抖動）。

（3） 細(xì)胞內(nèi)好像也有人存在

（4） 但并不引起培養(yǎng)液混濁

（5） 時(shí)間稍長，細(xì)胞狀態(tài)明顯惡化，最后死亡

大家的處理：

1.換好一點(diǎn)的血清（我覺著和血清的關(guān)系不大）。

2.如果是貼壁細(xì)胞的話，可用無菌的PBS洗幾次，可一定程度上緩解。若是懸浮的話，就不太好處理啦，可以向其中少加一點(diǎn)滋養(yǎng)細(xì)胞（從小鼠腹腔內(nèi)取得巨噬細(xì)胞，這種細(xì)胞不分裂，過一陣就死掉了，做抗體雜交瘤融合的同志肯定知道）。加滋養(yǎng)細(xì)胞對有黑膠蟲的剛復(fù)蘇的細(xì)胞很有效！還有就是實(shí)驗(yàn)環(huán)境要注意好，保持細(xì)胞間整個(gè)環(huán)境的潔凈度。

3.換用進(jìn)口的一次性塑料培養(yǎng)瓶。

4.建議清理無菌室所有物品，重新滅菌，用KMnO4熏蒸，按首次使用無菌室做，細(xì)胞重新復(fù)蘇。

5. 在換液前先加入生理鹽水并輕輕拍打，沖洗干凈后再加入培養(yǎng)液，堅(jiān)持天天洗，傳代時(shí)加生理鹽水再離心一次，接種密度稍大一些，一段時(shí)間后，蟲子就會大大減少，對細(xì)胞的生長也不會有大的影響。

6.有材料稱minocycline具有一定的作用，可以和換液結(jié)合起來使用。

在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，人們遇到的黒膠蟲并不都是一樣的，有像細(xì)菌的、有像支原體的、有像原蟲的、有像真菌的，還有像細(xì)胞碎片的。在國內(nèi)各實(shí)驗(yàn)室的器材條件參差不齊，而且實(shí)驗(yàn)人員的操作質(zhì)量也不盡相同，同一種現(xiàn)象也可能有些許差異，當(dāng)用描述出來的現(xiàn)象的差異可能變大也可能變小。所以很多人看到細(xì)胞被細(xì)菌污染了，不好處理，而且描述出來的現(xiàn)象和流傳的黑膠蟲類似，就會把培養(yǎng)失敗的原因歸結(jié)到無法處理的黒膠蟲污染，甚至可能說它發(fā)現(xiàn)的是真正的黑膠蟲。這樣的事情多了，黑膠蟲就會人為的變種，像什么的都有。黑膠蟲是否存在，還有待于科學(xué)的發(fā)展。但有一點(diǎn)可以肯定的，大部分人發(fā)現(xiàn)的“黒膠蟲”并不是真正那個(gè)未知的黒膠蟲，而是不很常見的細(xì)菌、真菌、原蟲等微生物污染。

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1、青霉素-鏈霉素-兩性霉素B溶液（100×） BC-CE-012

兩性霉素B（Amphotericin B），為多烯類抗真菌藥物。對本品敏感的真菌有新型隱球菌、皮炎芽生菌、組織胞漿菌、球孢子菌屬、孢子絲菌屬、念珠菌屬等。

2、鹽酸環(huán)丙沙星溶液（20mg/mL） BC-CE-014

環(huán)丙沙星(Ciprofloxacin)屬于一種高效廣譜抗生素，CAS號為85721-33-1，分子量為331.35。環(huán)丙沙星抑菌原理在于抑制細(xì)菌DNA解旋酶，阻止細(xì)菌復(fù)制，所以快速降低細(xì)菌繁殖，是殺菌型抗菌藥。環(huán)丙沙星作用方式特殊，除喹諾酮類外，與其它任何抗生素不同。因此，環(huán)丙沙星對青霉素類，頭孢菌素類，氨基糖甙類和四環(huán)素類耐藥菌珠均顯較高抗菌能力。

3、支原體清除試劑 BC-CE-019-10mL

成分：分別是大環(huán)內(nèi)酯類抗生素和四環(huán)素類衍生物。